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更多> 【儀器網(wǎng) 解決方案】液相色譜儀的分離過(guò)程是在色譜分離柱中實(shí)現(xiàn)的,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱就是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭以及螺絲等組成,在色譜柱的使用過(guò)程中,有一些需要十分注意的地方,色譜柱的柱壓就是其中之一。
通常情況下,色譜柱柱壓與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果以及保留時(shí)間等密切相關(guān)。柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值而是指壓力波動(dòng)范圍在50 PSI(3.3 Bar)間(在使用梯度洗脫時(shí),柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的)。壓力過(guò)高過(guò)低都屬于柱壓?jiǎn)栴}。
一、壓力過(guò)高:
壓力過(guò)高是液相色譜儀使用中極為較為常見(jiàn)的問(wèn)題,主要指壓力突然升高,一般是由于流路堵塞的原因。此時(shí)應(yīng)分段進(jìn)行檢查。
1、斷開(kāi)真空泵的入口處,此時(shí)PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,查看液體是否自由滴下,如果液體不滴或緩慢滴下則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。
解決方法:用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下,則確定溶劑過(guò)濾頭正常。
2、打開(kāi)Purge閥使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子,如果壓力沒(méi)有明顯下降,則屬于過(guò)濾白頭堵塞。
解決方法:將過(guò)濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至100 PSI(6.7 Bar)以下,證明過(guò)濾白頭正常。
3、把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。
解決方法:如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,用流動(dòng)相沖洗柱子。
二、壓力過(guò)低:
1、壓力過(guò)低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏
解決方法:尋找各個(gè)接口處特別是色譜柱兩端的接口,把泄漏的地方旋緊。
2、另一個(gè)原因就是泵里進(jìn)了空氣,但此時(shí)表現(xiàn)的往往是壓力忽高忽低,更嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致泵無(wú)法吸上液體。
解決方法:打開(kāi)Purge閥,用3~5 ml/min的流速?zèng)_洗,如果不行,則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。
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