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MALDI-TOF應用 | 指尖上的食源性病原體鑒定

來源:島津企業管理(中國)有限公司   2020年09月07日 14:10  
  導讀
 
  指尖上的食源性病原體鑒定
 
  目前疫情仍在肆虐,做好個人的衛生防護非常重要。古人云:病從口入。意思是疾病多是由食物傳染。據世界衛生組織(WHO)報道,每年發生約5.8億例由食品引起的疾病,其中約有35萬例死亡。由于食源性細菌通常通過攝入受污染的食物進行傳播,因此不適當的食物處理可能會威脅到食物的安全性。雙手是日常生活中我們與外界接觸多的部位,也使得手成為病菌傳播的重要中轉站。不干凈的手部皮膚上每平方厘米密布著上百萬個細菌,因此洗手能很好的去除常見致病菌。公共衛生專家強調,應采用肥皂液或洗手液以少量水反復揉搓后,在流動水下沖洗干凈。
 
  食源性致病菌
 
  食品致病菌是可以引起食物中毒或以食品為傳播媒介的致病性細菌。致病性細菌直接或間接污染食品及水源,人經口感染可導致腸道傳染病的發生及食物中毒以及畜禽傳染病的流行。食源性致病菌是導致食品安全問題的重要來源。常見食品致病菌主要有痢疾桿菌、致病性大腸桿菌、沙門氏菌、霍亂弧菌、蠟樣芽胞桿菌、布氏桿菌、副溶血桿菌、單增李斯特菌、金黃色葡萄球菌等。
 
  以金黃色葡萄球菌為例,金黃色葡萄球菌是常見的食源性致病菌,廣泛存在于自然環境中。金黃色葡萄球菌在適當的條件下,能夠產生腸毒素,引起食物中毒。近幾年,金黃色葡萄球菌引發的食物中毒報道層出不窮,由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黃色葡萄球菌成為僅次于沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。
 
  探究指尖上的微觀秘密
 
  受試者在含有胰蛋白大豆瓊脂和5%綿羊血的血瓊脂培養基上輕輕印上5個手指的指紋。將血瓊脂平板上的來自于指紋的細菌置于5%CO2培養箱中37℃培養18至48小時。然后從培養皿中選擇不同的單一細菌菌落轉移至不同的血瓊脂平板上進行純細菌的培養。
 
  快速鑒定過程采用島津iDPlus微生物鑒定系統,其工作流程由樣品制備、質譜檢測和SARAMIS數據庫鑒定三個階段組成(圖2)。取瓊脂平板上的單菌落溶解于20μL的20%甲酸溶液中。將1μL的裂解液點在不銹鋼靶板上,再點上1μL基質溶液。然后,混合物在室溫下干燥,使基質和分析物分子形成共結晶。使用MALDI-TOF iDPlus Performance進行質譜檢測。將樣品質譜圖與SARAMIS數據庫中的超級譜圖進行比對來進行鑒定。
 
圖2. iDPlus微生物鑒定流程圖
 
  指尖上都有哪些細菌?
 
  未洗手的人指紋樣本中發現了14種微生物 (表1)。其中,從未洗手的指紋樣品中發現了蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。這兩種菌屬于疾病控制和預防中心列出的食源性致病菌。當感染者赤手觸摸或攝入食物時,這些細菌很容易被傳播。圖3a和3b顯示蠟樣芽孢桿菌(a) 和金黃色葡萄球菌 (b) 的質譜圖和細菌培養形態圖。
 
  【重要提醒!】研究顯示,充分洗手后,在洗凈手指的指紋樣本中已找不到病原體。
 
  表1 iDPlus平臺對受試者未洗手的指紋樣品微生物鑒定結果
 
  圖3. 蠟樣芽孢桿菌 (a) 和金黃色葡萄球菌 (b) 的質譜圖和細菌培養形態圖
 
  “看見”細菌和“認識”危害的有效手段
 
  隱藏在微觀世界中的各類細菌幾乎布滿我們日常生活中的所有區域,*的隔離和避免接觸是不現實的,讓大眾能夠“看見”和充分“認識”細菌的所在和危害,可以引起社會衛生觀念的提升和全民健康意識的提高,科學儀器就是此間有效的手段。島津iDPlus Performance結合SARAMIS數據庫快速可靠地用于未清洗的手指上的微生物鑒定(包括各種食源性病原體)以及洗手后不存在微生物的驗證。正確處理食物和實施衛生管理對于降低人與人之間傳播感染性病原體的風險非常重要。
 
  友情提示
 
  疫情期間,建議大家在處理食材前后、進食前、如廁后、擰鼻涕后以及就醫和接觸動物后及時洗手。后提供正確洗手姿勢供大家參考,口訣是“內、外、夾、弓、大、立、腕”,謝謝!
 

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